L'oeuvre poétique de Fray Luis de León le met au premier rang du lyrisme espagnol. Seul en ce domaine,
Jean de la Croix lui dispute la palme à son époque. Comme celle du Docteur mystique, l'oeuvre poétique de Fray Luis est brève : vingt-trois poèmes. On y distingue quelques sommets : Vie de retraite, À Franscisco Salinas, Nuit sereine, À Felipe Ruiz, Repos après la tempête, Demeure du ciel, L'Ascencion… Les thèmes de ces odes célèbres sont chrétiens, néo-platoniciens, religieux ou mystiques, entremêlés, de façon émouvante, des troubles et du désarroi d'un esprit profondément blessé par l'injustice et aspirant de toute sa ferveur à la contemplation du divin. Une très fine perception de la nature (la campagne, la nuit, le ciel étoilé…) donne à ce lyrisme à la fois beaucoup de fraîcheur et une ampleur cosmique.
En quelques mots, Unamuno l'a caractérisé ainsi : “Platonicien, horatien, virgilien, âme en laquelle venaient se fondre l'épicurisme et le stoïcisme dans le christianisme, épris de paix, de sérénité et d'harmonie.”
Outre ses traductions tirées des Ecritures,
Fray Luis de León est aussi l'auteur unanimement admiré de traductions en castillan de poètes grecs et latins.